长达231nt，编辑效率经验证！金斯瑞pegRNA助力Prime Editor实现更安全高效的基因编辑

Prime Editor由Nickase Cas9-逆转录酶和pegRNA构成，Cas9-逆转录酶会在pegRNA的引导下，精准地切开目标DNA单链，根据逆转录模板，合成含有正确序列的DNA，完成基因编辑。

其中，pegRNA长度一般在110nt以上，pegRNA组成与功能如下：

• 引导序列（Spacer）：特异性结合至目标序列

• 骨架序列（Scaffold）：固定序列，与Nickase Cas9结合

• 逆转录模板（RTT）：包含编辑序列信息

• 逆转录引物结合位点（PBS）：开启逆转录反应

• 3端修饰motif（可选）：可添加3’tevopreQ1 motif等修饰，防止3端序列被降解，提升编辑效率

金斯瑞深耕寡核苷酸合成22年+，可提供长达231 nt的全化学合成长链RNA，稳定的质量和优越的编辑效率获得国内外客户的高度认可。

金斯瑞pegRNA服务优势：

• pegRNA长达231 nt！支持脱盐和HPLC级别，分子量精准，纯度高，批次间一致性好

• 编辑效率高超过60%！提供默认修饰或定制3’端修饰motif提升编辑效率

• 一站式解决方案！提供PE2/PE3 mRNA、nicking sgRNA、经实验验证的操作指南

• RUO至GMP级别的产品！全程支持您的项目从研发阶段走向临床研究和IND申报

金斯瑞pegRNA服务详情：

• 合成长度：110-231 nt

• 默认修饰：默认修饰更稳定，常规硫代、2'-甲氧基修饰不额外收费

• 纯化方式：脱盐或HPLC

• 交付规格：2-100nmol 干粉（默认），TE buffer / Nuclease-free water（可选）

• 交付报告：脱盐-MS和COA报告，HPLC纯化-MS、HPLC报告（纯度≥85%）、COA报告

• 生产周期：7个工作日起

案例1. 长达231 nt！分子量精准，纯度高达97%

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案例2.  pegRNA 编辑效率高达63.5%

实验方法：

• HEK293T cells (0.2 x 10⁶个细胞) ，靶向HEK3位点，敲除5bp碱基

• 以3：1的比例电转脱盐或HPLC纯化的pegRNA (141nt) 和nicking sgRNA，加入0.15μg、0.25μg、0.375μg、0.5μg、0.75μg、1.0μg的PE2/PE3 mRNA

• 3天后提取基因组DNA，通过Sanger测序检测基因编辑效率

实验结果：

• HPLC 纯化pegRNA编辑效率高达63.5%，脱盐pegRNA编辑效率高达52.5%

案例3. 添加3'tevopreQ1 motif，编辑效率提升40%

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实验方法：

• HEK293T cells (0.2 x 10⁶个细胞) ，靶向HEK3位点

• 电转1μg PE2/PE3 mRNA, 30pmol nicking sgRNA和90pmo不同长度的pegRNA (HPLC纯化)

• 3天后提取基因组DNA，通过Sanger测序检测基因编辑效率

实验结果：

• pegRNA的编辑效率可能随pegRNA增长而降低

• 添加 3'tevopreQ1 motif的pegRNA编辑效率可高达43.4%，远高于不加该结构的pegRNA（仅3.2%）

案例4. 脱盐与HPLC pegRNA细胞毒性低

实验方法：

• HEK293T 细胞 (0.2 x 10⁶个细胞) ，靶向HEK3位点

• 以3：1的比例加入脱盐或HPLC纯化的pegRNA (141nt) 和nicking sgRNA，同时分别加入0.5μg、0.75μg、1.0μg的PE2/PE3 mRNA

• 3天后，检测细胞毒性，相对细胞活性% = pegRNA加样组细胞数量 / 空白组细胞数量

实验结果：

• 脱盐或HPLC纯化的pegRNA在45 pmol，67.5 pmol，90 pmol的浓度下对HEK293T细胞无明显细胞毒性

欢迎咨询金斯瑞pegRNA合成服务，专业技术支持为您服务：

邮件：oligo@genscript.com.cn

电话：400-025-8686转5812或5815