细胞膜损伤LDH释放检测应用文献: Science:“战士”GBP蛋白家族的工作原理 LDH释放经常会被用于检测药物或者其他形式导致的细胞毒性,LDH释放可以作为判断细胞膜完整性的重要指标。 耶鲁大学 MacMicking 团队在2024年Science上发表"Native architecture of a human GBP defense complex for cell-autonomous immunity to infection”的文章。 原文链接: https://doi.org/10.1126/science.abm9903 01 文章亮点总结 所有生物体都部署了细胞自主防御机制来对抗感染。在植物和动物中,大型超分子复合物通常激活免疫蛋白以提供保护。在这项工作中,我们解析了一个巨大的宿主防御复合物的天然结构,该复合物能够在人类细胞内的革兰氏阴性细菌表面聚合3万个鸟苷酸结合蛋白guanylate-binding proteins (GBPs)。这个巨大的纳米机器的构建需要几分钟时间,并能稳定维持数小时,此过程依赖于鸟苷三磷酸(GTP)的水解,并招募了四种GBP以及caspase-4和Gasdermin D作为细胞因子和细胞死亡免疫信号的平台。冷冻电子断层扫描表明,GBP1可以采取一种伸展构象插入细菌膜来建立此平台,从而触发脂多糖释放,激活共组装的caspase-4。我们的“开放构象”模型提供了一个动态视角,展示了人类GBP1防御复合物如何动员先天免疫对抗感染。 02 细胞膜损伤LDH释放检测 作者检测乳酸脱氢酶(LDH)的释放主要是为了评估细胞的焦亡(pyroptosis)状态。焦亡是一种程序性细胞死亡的形式,通常伴随着细胞膜的破裂和细胞内容物的释放,其中包括LDH。因此,LDH的释放水平可以作为细胞焦亡或细胞死亡程度的一个指标。GBP1(鸟苷酸结合蛋白1)在细胞自主免疫中起着关键作用,它能识别并响应病原体的存在。通过检测LDH的释放,可以评估GBP1激活后是否促进了细胞的焦亡,从而清除感染的病原体。LDH的释放也可以反映炎症小体(inflammasomes)的激活,这是一个复杂的蛋白质结构,当细胞感知到危险信号时会被激活,引发细胞焦亡并释放促炎细胞因子。通过比较不同条件下LDH的释放量,可以研究GBP1和其他相关蛋白(如caspase-4和gasdermin D)在细胞死亡过程中的作用和相互关系。而检测LDH的释放是评估细胞焦亡程度的一种常用方法,它有助于理解细胞自主免疫过程中GBP1防御复合体的作用机制,以及它如何影响细胞的命运和抗感染的能力。 03 LDH释放检测方法对比 CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay Kit (G1780)是一种检测细胞膜受到破坏后释放出乳酸脱氢酶(LDH)的量从而检测细胞毒性的检测试剂盒。而这种特性可以应用于多种细胞介导的细胞毒性检测中,检测靶细胞受到效应细胞作用后带来的细胞膜破损从而释放的LDH。 G1780 拥有海量引文, 性能经过长时间和大量的客户验证 推荐指数 ABOUT PROMEGA 关于Promega公司 Promega Corporation是一家为生命科学行业提供高质量解决方案和技术支持的全球领先生物技术企业。在其44年的历史中,Promega已建立了包含有4000多种支持细胞和分子生物学的目录产品和定制产品的组合。如今,Promega开发的萤光素酶(即荧光素酶)等技术推动了活细胞分析、药物发现、分子诊断和人体识别等领域的创新,并且由实验室科学家和技术人员用于学术和政府研究、法医学、制药、临床诊断以及农业和环境检测。Promega总部位于美国威斯康星州麦迪逊市,在16个国家设有分公司,拥有50多家全球经销商。如需获取更多信息,请访问www.promega.com。 产品信息 说明书查询 实验工具 技术资料









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