突破！联盟副理事长-金域医学创新发作性睡病诊断技术助力实现食欲素检测本土化

2025/05/16

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缺血性卒中中山大学广州金域医学检验集团股份有限公司

近日，空军军医大学唐都医院与联盟副理事长-金域医学开展的联合科研攻关取得重要突破。双方在国内率先开发出液相层析串联质谱法（LC-MS/MS）检测脑脊液食欲素（Hcrt-1）的方法，打破了该指标受制于国外检测方案的卡脖子问题，以更安全、高效、便捷的检测技术，为发作性睡病这一罕见病的精准诊疗本土化提供关键助力。相关研究成果发布于中国科技核心期刊《中风与神经疾病杂志》。

自主研发

打破国外检测方案卡脖子问题

发作性睡病是一种病因尚不明确的睡眠障碍，2023年被正式纳入《第二批罕见病目录》，困扰着我国约70万患者。其核心临床表现为“五联征”：日间不可控的过度睡眠、情绪诱发的猝倒发作、睡眠瘫痪、睡眠幻觉及夜间睡眠障碍。根据是否伴发猝倒症状，分为1型（伴猝倒）和2型（不伴猝倒）两种亚型，检测脑脊液中食欲素水平是疾病诊断的“金标准”。

目前国际指南认可的食欲素检测方法为放射免疫法（RIA），国外大多采用美国凤凰公司（Phoenix Pharmaceuticals）试剂盒。金域医学作为国内为数不多具备放免实验室的第三方医检公司，已率先采用该试剂方案开展食欲素放免法检测。

但随着临床实践，其局限性也随之显露——一方面，受国外试剂进口流程较长、物流特殊要求、试剂中I¹²⁵同位素的衰减（半衰期约为60d即试剂保质期为60天）等影响，供货周期极不稳定；另一方面，该方法学具有放射性，需考虑安全防护问题，且检测步骤多、反应时间长（约需48h），流程极为缓慢与繁琐。

近年来，国外采用质谱法检测食欲素的研究陆续出现。基于沉淀多年的丰富质谱技术平台经验，空军军医大学唐都医院和金域医学自主研发出液相层析串联质谱法检测食欲素技术，打破国外检测方案的卡脖子问题，为发作性睡病精准诊疗本土化开启了新的篇章。

质谱法食欲素检测

精准、高效、安全、便捷

该检测方案包括标准品和内标准备、样品前处理、样品分析等全流程，关键结论如下：

LC-MS/MS可有效区分I型发作性睡病（NT1）和非发作性睡病患者

研究纳入14例NT1和10例非发作性睡病对照组，均采用LC-MS/MS进行脑脊液食欲素水平检测，其中NT1组同时采用放免法检测。结果显示，NT1组脑脊液食欲素水平均降低，放免法为（33.74±27.54）pg/ml，LC-MS/MS为（17.80±20.64）pg/ml，与非NT1组的（493.6±296.42）pg/ml可进行有效区分。

LC-MS/MS检测 Hcrt-1有更宽的定量范围

通过检测稀释成不同浓度的分析物，研究团队发现质谱方法在5~2500pg/ml的范围内有良好的线性关系（R2=0. 9978），而放免法的检测范围据说明书为10~1280pg/ml，意味着质谱法能提供更宽范围的定量检测结果，且经验证具有良好重复性和回收性。

LC-MS/MS检测用时短，且具有绝对定量优势

放免法检测过程中需要抗原抗体过夜孵育结合，全流程需要大约48小时，不仅用时长，还可能导致一些非特异性结合或背景读值。而LC-MS/MS检测步骤相对简单，样本加入内标后固相萃取物直接测定食欲素，检测的信号是与内标并行的待测样本中质谱图的峰值或面积，是绝对定量，不存在背景值的问题，使得检测更容易和准确。

本次研究，初步证实了LC-MS/MS测定脑脊液中食欲素水平的可行性，且具有无放射性、可绝对定量、检测用时短、可本土开展等优势。

以创新驱动助力构建

罕见病精准诊断生态

从率先开展食欲素检测，到加入中国发作性睡病协作组成为唯一第三方医检机构，再到发布超千例罕见病大样本检测数据，金域医学始终致力于推动发作性睡病筛查、诊断、治疗的诊疗一体化路径闭环。