Biacore解锁中药奥秘：精准药理与高效筛选

在这一背景下，深入研究中医药的药理机制，明确其活性成分及其与生物靶标之间的相互作用，从而进行新药开发，成为中医药现代化研究的关键所在。这不仅有助于提升中医药的临床疗效，还能为中药新药的开发提供科学依据，促进中医药在全球范围内的广泛应用。

Biacore基于表面等离子共振 (SPR) 技术，凭借其高灵敏度、实时检测以及无需标记等优势，为中医药研究提供了一种全新的视角和工具。不仅是对传统研究方法的有益补充，更可以推动中医药现代化、国际化。

2021年，第二军医大学联合上海大学建立了一套基于Biacore的方法来筛选中药活性成分的方法。以白芍根 (RPA) 为例，利用Biacore技术揭示了白芍根抗炎机制及其活性成分。

研究人员利用Biacore CM5芯片固定TNF-R1蛋白，将一系列不同稀释比的RPA提取物注入芯片表面，以初步评估潜在生物活性成分与TNF-R1之间的相互作用。有趣的是，RPA提取物对TNF-R1的结合活性呈浓度依赖性（图1.A），这表明RPA提取物中的某些成分能够与TNF-R1结合。为了揭示哪些成分能够与TNF-R1结合，研究人员使用Biacore进行了垂钓实验，回收到了与TNF-R1结合的活性成分。将收集到的样品在UPLC-QTOF/MS系统上进行鉴定（图1.B-F）， 实验结果显示，芍药苷和丹皮酚被鉴定为潜在的活性成分。

慢性高血压是人类最常见的慢性疾病之一，其长期发展可通过引起心脏、肾脏、大脑和眼睛等多个靶器官的结构和功能变化，严重危害人类健康。目前，血管紧张素转化酶抑制剂 (ACEI) 已成为预防和控制高血压最常用的治疗方法之一。卡托普利、依那普利、福辛普利等ACEI药物在临床实践中得到了广泛应用。然而，尽管这些药物具有治疗效果，但也伴随着一些严重的副作用。近年来，许多天然化合物被发现具有强大的ACEI活性。

近年来，已经创建了多种筛选天然抑制剂的技术，包括磁珠固定化、酶固定化、比色法、分光光度法、荧光法、高效液相色谱法等。但这些方法存在实验复杂，结果易受温度影响，结果重复性差的问题，此外，上述方法无法提供抑制剂与靶标的动力学信息，这对于后续的构效关系研究和化合物的结构转化至关重要。

研究人员选择了Biacore技术作为筛选天然化合物的关键技术，如表1所示，槲皮素、原花青素、异槲皮苷、金丝桃苷、芹菜素、葛根素和槲皮素醇等化合物均以剂量依赖的方式与芯片上的可溶性ACE1 (sACE1) 结合，类似于阳性试剂卡托普利。对比发现，异槲皮苷（图4）对sACE1的亲和力最强（KD 5.76×10⁻⁶ M），而阳性对照卡托普利和槲皮素醇的亲和力最弱（KD 4.83×10⁻⁵ M）。