双抗分子如何开展效价测定，使用Biacore就对了

罗氏制药收购的基因泰克公司于2022年1月28日宣布，FDA已批准使用Vabysmo (faricimab-svoa) 治疗湿性或新生血管性年龄相关性黄斑变性 (nAMD) 、糖尿病性黄斑水肿 (DMF) 、视网膜静脉阻塞 (RVO) 患者，它是首款获FDA批准用于眼部的双特异性抗体。

早在2014年，罗氏研发中心就围绕faricimab展开了其效价测定方案的研发工作。接下来，让我们重温经典，一起来看看具体的实验设计及数据吧！

在图1实验方案中，R1数值代表了faricimab针对VEGF的结合活性，而R2信号值取决于结合在VEGF芯片上的双抗数量及真实活性。

为探究faricimab在此效价测定方案中的浓度依赖现象，研究人员在Injection 1中，选择上样0.35 μg/mL-30 μg/mL的双抗，Injection 2中的Ang-2抗原保持30 s，1 μg/mL的实验参数，结果如图2所示，R2信号随着faricimab的进样浓度增加呈S曲线趋势，当faricimab的进样浓度高于10 μg/mL时，R2信号呈负增长趋势。因此，在后续的实验中，faricimab的进样浓度低于10 μg/mL。

为探究precision、accuracy、linearity与specificity等性能参数，研究人员选择了slope-ratio、parallel-ratio模型进行了数据采集及分析工作。同时，也选择了parallel line model进行数据采集及分析，具体见图3。

在此篇方法开发类文章中，我们看到了诸多流程示意图及实验图谱。研究人员搭建的效价测定方案中，采用了最佳的实验参数及数据分析模型。最终线性相关性R²=0.9997，准确性97%，偏差2%。

相较传统的终点检测法（例如ELISA），Biacore在开展相关实验方案的制定时采用了在线测量方式，无需把实验分割成多步实验去完成，减少了可变量因素。同时，Biacore采用了label-free检测方式，检测信号与芯片表面质量的变化呈正相关关系，所以无需对检测样本做预标记处理，降低了实验复杂度及样品消耗。