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人参皂苷Rg3诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡的实验研究

亚泰制药亚泰制药
2024/10/11
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282
大连医科大学 乳腺癌 MCF-7

本宣传仅供医学药学专业人士阅读，请按医师或药师指导下使用。

本文是大连医科大学生物化学与分子生物学教研室陈俊霞，崔秀云、大连医科大学附属第一医院肿瘤科刘基巍等人共同发表的文章，目的在于探讨Rg3抑制乳腺癌细胞的作用及其诱导凋亡的机制。研究表明，Rg3可通过诱导MCF-7细胞凋亡而发挥其抑制细胞增殖的作用。



No.1

材料与方法



△细胞培养

MCF-7细胞贴壁培养于含10%胎牛血清、100kU/L青霉素、100mg/L链霉素的DMEM培养液中，置37℃、5%CO2的饱和湿度培养箱中培养。

△检测指标

MTT法检测人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖活力；荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化；流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡；琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状带。

△统计学分析

所有的数据用SPSS11.5统计软件进行分析，生长抑制率与药物浓度的关系用直线回归与相关分析，其余的值用t检验，α=0.05为检验水准。



No.2

结果



Rg3对细胞增殖活性的影响

用高浓度的Rg3处理细胞产生明显的细胞毒性作用，最终导致细胞死亡。当Rg3的浓度在37.5μg/ml~600μg/ml之间时，细胞增殖被抑制，以Rg3不同浓度和肿瘤细胞生长抑制率作直线回归和相关分析，相关系数(r)=0.953，P=0.003，Rg3处理细胞48h的IC50为71.91μg/ml(表1)。

（点击图片，查看全部）


Rg3诱导细胞凋亡的形态学观察

荧光显微镜下观察150μg/mlRg3处理后的MCF-7细胞48h后，可见典型的凋亡细胞形态，即染色质凝集、核片段化、凋亡小体、核内可见致密的颗粒状荧光。而对照组细胞核呈弥漫均匀荧光，且荧光较弱(图1)

（点击图片，查看全部）


Rg3对细胞周期和细胞凋亡率的影响

流式细胞术检测表明Rg3能诱导细胞凋亡及调节细胞周期，用150μg/ml的Rg3处理细胞48h后，S期和G2-M期的细胞比率增加，G0-G1的细胞比率下降。细胞凋亡率从对照组的(0.45±0.25)%上升到(34.86±4.65)%(表2)。

（点击图片，查看全部）


DNA琼脂糖凝胶电泳用150μLg/ml的

Rg3处理细胞24h和48h后，提取细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳，检测到细胞发生凋亡时由于DNA有规律的降解而出现典型的DNA梯形条带。随着药物作用时间的延长所形成的DNA梯形条带越亮，表明细胞凋亡程度越大（图3）。

（点击图片，查看全部）



No.3

结论


本实验结果表明Rg3对MCF-7细胞有显著的诱导凋亡作用。结果显示，Rg3因能显著地抑制细胞增殖，调节细胞周期和诱导凋亡以及引起细胞形态的改变，这个研究对于Rg3应用于临床的肿瘤包括乳腺癌的化疗提供了有价值的实验依据。


文献来源：癌变 畸变 突变，2005年第17卷第4期。

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