生物类似药的非临床药代动力学研究关注点（上）

生物类似药是目前国内外生物药研发领域的热点。非临床药代动力学（PK）相似性研究作为生物类似药开发过程中不可或缺的一项内容，其中，动物试验设计、生物分析方法和生物相似性结果评价均是生物类似药的非临床药代动力学研究的关注重点。本篇先对生物类似药及其非临床相似性评价进行了简要概述，并讨论了在非临床药代动力学研究中的动物试验设计，下一篇我们将对生物分析方法和生物相似性结果评价进行讨论。

生物类似药是指在质量、安全性和有效性方面与已获准注册的市售对照药具有相似性的治疗用生物制品^[1]。不同于化学仿制药，生物类似药在物理化学和生物特性方面不可能与市售对照药完全一致，即使市售对照药的同一批次内或不同批次间，都可能存在细微差异。具体生物类似药与化学仿制药的差异对比可见下表1。

表 1  生物类似药与化学仿制药的区别^[2],[3]

生物类似药的非临床相似性评价为逐步递进式，会受到市售对照药性质及其复杂性的影响。欧洲药品管理局（EMA）、美国食品药品管理局（FDA）和中国国家药品监督管理局（NMPA）均针对生物类似药开发颁布了相关指导原则。针对不同的指导原则，关于生物类似药是否需要开展整体动物实验及需要开展的整体动物实验类型有不同的要求，见表2。

表 2 各国生物类似药指导原则对非临床研究的要求汇总

注：+、-和±分别表示应开展、无需开展和根据产品具体情况决定是否需要开展试验。

FDA指导原则要求生物类似药开展动物PD和PK（含免疫原性）比对试验，这与EMA和NMPA的指导原则略有差异，但随着生物类似药审评和审批经验的积累，各指导原则对生物类似药动物实验PD、PK和毒性（含免疫原性）比对试验的要求已趋于相似。NMPA指导原则认为，对于候选药和市售对照药非临床相似性的评估，应建立在对市售对照药药学、非临床、临床特性充分了解的基础上，并根据前期药学比对试验结果，设计科学合理的比对性研究，对药学比对试验研究显示候选药和市售对照药无差异或很小差异的，可仅开展体外药效学、药代动力学和免疫原性的比对试验研究。对体外药效、药代和免疫原性试验结果不能判定候选药和市售对照药相似的，应进一步开展体内药效和毒性的比对试验研究^[2]。尽管如此，在我国目前开展的生物类似药的研发过程中，大多都会进行动物的体内药效学、药代动力学和毒理学研究。

非临床药代动力学研究是生物类似药非临床相似性评价中必不可少的研究内容。对于生物制品，非临床药代动力学研究中会伴随考察免疫原性。非临床药代动力学研究和免疫原性研究对于评估候选药与市售对照药的药代动力学特征及免疫原性的发生和程度有着极其重要的作用。

一般采用成年和健康的动物。常用动物有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、小型猪和猴等。在考虑与人体药代动力学性质相关性的前提下，尽可能选择与毒理学和药效学研究相同的动物，并参考市售对照药非临床药代动力学研究所选用的试验动物种属，选择一种动物进行候选药与市售对照药的药代动力学特征相似性评价。再者，尽量在动物清醒状态下进行试验，最好从同一动物多次采样获取药代动力学参数^[3],[4]。

市售对照药是指已获批准注册的，在生物类似药研发过程中与之进行比对试验研究用的产品，包括生产用的或由成品中提取的活性成分，通常为原研产品。而候选药是指按照生物类似药研发和生产的，用于比对试验研究的药物^[1]。在药学相似性研究中，市售对照药与候选药的选择遵循原则具体见下表3。

表 3  市售对照药和候选药的选择^[2]

候选药和市售对照药可设1~3个剂量组，市售对照药剂量应与候选药相同，设候选药组和市售对照药组，一般为2+2平行设计。毒理学研究中，设溶媒对照组、候选药组和市售对照药组。候选药设1~3个剂量组，市售对照药至少设1个剂量组，一般为1+3+1设计^[3]。参考市售对照药的治疗剂量范围及其PK特征，结合候选药的有效剂量及敏感剂量进行试验，建议在正式试验开展之前进行预试验，根据预试验的结果，调整给药剂量^[5]。

生物类似药的半衰期一般较长，通常采用平行试验设计。

当半衰期较短时，兼顾动物福利的3R原则，可采用双交叉试验设计，如表4。若生物类似药可诱导免疫反应，采用双交叉试验设计时应注意周期间隔，不仅要考虑药物的消除，还应考虑到药物的免疫原性，确保第2周期试验开始前药物消除完全且无相应抗药抗体的产生。此外，进行组别设计时，当受试动物的体重相差较大时，应对体重进行均衡后再分组。

表 4  两制剂、双周期的交叉试验设计

注：“T”表示候选药；“R”表示市售对照药。

可为单次给药药代和重复给药药代，一般为单次给药。单次给药的药代试验应单独开展；重复给药的药代试验可结合在重复给药毒性试验中进行。对结合开展的药代试验影响主试验药物效应或毒性反应评价的，应进行独立的重复给药比对试验研究来评估药代特征变化^[1],[3]。

整个采样时间应持续到3~5个半衰期，或持续到血药浓度为Cmax的1/10~1/20，避免AUC0~t与AUC0~∞的比例小于80%，同时应注意采血途径和整个试验周期的采血总量不影响动物的正常生理功能和血液动力学^[4]。