在基因编辑领域, CRISPR-Cas9 及其拓展工具 (碱基编辑器、先导编辑器等) 提供了极其丰富的 toolbox 实现小片段 DNA 的高效精确编辑 (删除、替换与插入) ,然而千碱基级大片段 DNA 分子模板敲入仍然面临效率低下、精准性不足等问题,长期制约着基础生物医学研究 (生殖生物学、细胞生物学、肿瘤免疫学等领域多种多样的细胞、动物模型制作) 与转化应用的发展。 目前大片段基因敲入在构建长片断融合标签、人源化转基因动物模型、制备 CAR-T 细胞以及赋予植物抗病抗逆性等方面具有不可替代的价值,因此 开发新型高效精准的大片段基因敲入工具,成为该领域的重要研究方向 。 近日,中国科学技术大学 鲍坚强 / 程临钊 课题组联合南京医科大学 王成坤 课题组、山东大学 刘洪彬 / 张友明 课题组等,在 Nature Communications 杂志发表了题为 Efficient high-precision transgene knock-in by Recombinases (Redα/β)-enhanced DNA integration-CRISPR-Cas9 (RED-CRISPR) 的研究论文, 报道了一种基于 Redα/β 重组 酶增强 的高效精准大片段基因敲入系统 ,为解决上述瓶颈提供了创新方案。
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