聚焦前沿，共探克服EGFR-TKI耐药的治疗策略与临床转化研究

EGFR作为关键致癌驱动因子在NSCLC的发生发展中起着重要作用，第三代TKI药物奥希替尼尽管在EGFR突变NSCLC中显示出显著疗效，但最终也不得不面对耐药性这一重大问题。本研究证实^[1]，血根碱——一种源自加拿大血根草根茎的天然苯并菲啶生物碱能够在奥希替尼耐药细胞中诱导铁死亡，从而导致细胞死亡。与奥希替尼敏感细胞系相比，血根碱在奥希替尼耐药细胞系中诱导了更多细胞死亡。RNA测序显示，血根碱在奥希替尼耐药细胞系中引发的HMOX1表达水平升高更为显著。此外，相较于奥希替尼敏感细胞系，血根碱在奥希替尼耐药细胞系中诱导了更多活性氧的产生，提高了Fe²⁺浓度，并极大地促进了铁死亡。此外，研究发现从EGFR-TKI治疗复发的EGFR突变NSCLC患者组织中HMOX1水平升高。同时，奥希替尼及其他EGFR-TKI能上调EGFR突变NSCLC细胞和肿瘤中的HMOX1表达。在奥希替尼敏感的EGFR突变NSCLC细胞中强制表达异位HMOX1基因，通过诱导更多铁死亡增强了细胞对血根碱的敏感性；而在奥希替尼耐药细胞系中敲除HMOX1基因则导致对血根碱产生耐药。而且在体内实验中，血根碱对奥希替尼耐药EGFR突变NSCLC异种移植瘤的抑制效果优于敏感模型。

综上，与奥希替尼敏感细胞系相比，血根碱在奥希替尼耐药细胞系中通过诱导更多ROS产生和增加Fe²⁺浓度，导致了更显著的铁死亡。这种差异可能源于奥希替尼耐药细胞中HMOX1的过表达，使其对血根碱的作用更为敏感。鉴于此，血根碱未来或可成为克服奥希替尼耐药的治疗选择。

约3-10%的EGFR突变NSCLC病例转化为小细胞肺癌（SCLC），临床对于驱动这种转变的机制知之甚少。为了解患者在转变为SCLC期间的蛋白质组差异，特进行本研究，以确定潜在的发生机制和治疗敏感性。在整合两个队列数据并校正批次效应后，结果显示^[2]，肺腺癌转化前（preADC）与SCLC转化后的肿瘤区域之间存在明显分离。蛋白质差异表达分析显示，转化前肿瘤表现出免疫调节蛋白表达上调，包括IDO1、VISTA、INPP4B、MET、Tim-3、CD45和STING，表明存在活跃的免疫逃逸机制。相比之下，转化后肿瘤则显示CD56、PARP、BIM、Ki-67和泛AKT蛋白表达升高，这与SCLC典型的高CD56表达特征、DNA损伤修复通路失调以及NSCLC向SCLC转化中涉及的AKT通路激活相一致。对肿瘤微环境（TME）的进一步分析发现，转化前TME中CD45、CD11c和CD4表达更丰富，而转化后TME中GZMB、CD56和PARP水平更高。这些TME研究结果表明SCLC呈现"免疫冷"表型，其特征是免疫细胞浸润稀少且对细胞凋亡的抵抗增强。此外，蛋白质表达谱分析提示，免疫检查点可作为有前景的潜在治疗靶点，包括在转化前和转化后样本中均存在的B7H3和LAG3。综上，该结果凸显了从肺腺癌向小细胞肺癌转化过程中的分子表型与免疫因子的改变。转化后肿瘤及其微环境中蛋白质表达的变化反映出其为具有侵袭性的肿瘤表型，即免疫抑制、DNA损伤和细胞凋亡通路的改变。这些发现为存在SCLC转化的EGFR突变NSCLC提出了潜在的治疗靶点。

本研究通过转基因小鼠模型构建了EGFR突变肺癌模型，经鼻内递送携带GFP-Cre的腺病毒后，监测肿瘤进展与免疫细胞浸润情况。在注射Ad-GFP-Cre后4-6周，研究观察到持续且明显的肿瘤生长，由此确立了治疗干预的关键窗口期。注射后2周，肺组织显示CD8+ T细胞大量浸润，表明强烈的初始免疫应答。但随着时间推移，调节性T细胞水平显著上升。Treg的累积与肿瘤生长及细胞毒性T细胞功能抑制同步出现，提示微环境向免疫抑制状态转变。CD4+ T细胞数量保持相对稳定，凸显了Treg在促进免疫逃逸中的特异性作用。所有荷瘤小鼠均检测到针对EGFR的系统性适应性免疫，这印证了局部免疫抑制在EGFR阳性肿瘤演进中的强大效力。本研究在注射后4周开始对小鼠使用PD-1抑制剂，肿瘤反应微弱，这与免疫检查点抑制剂（ICI）对EGFR突变NSCLC疗效有限的临床观察结果一致。早期细胞毒性免疫应答浪潮与后续Treg介导的免疫抑制，为探索潜在治疗靶点提供了重要线索。该模型将成为探索不同EGFR-TKI及其与各种免疫治疗联合的理想平台，助力探寻更优的联合治疗策略，为EGFR突变NSCLC的创新疗法和改善患者预后提供重要参考。

近期研究表明，癌症相关成纤维细胞可能在TKI耐药中发挥作用。值得注意的是，本研究观察到从TKI耐药肿瘤建立的患者来源癌症相关成纤维细胞系表现出异质性表型，且具备挽救癌细胞免受TKI杀伤的能力。为同步探索肿瘤细胞内在性与基质驱动性的奥希替尼耐药机制，本研究开发了全基因组CRISPR增敏筛选方法，该方法整合了奥希替尼耐药的患者来源EGFR突变NSCLC细胞系，以及匹配的永生化PDFs的条件培养基。这些研究旨在揭示内在与外在耐药通路，并为下一代克服奥希替尼获得性耐药的治疗方案提出潜在靶点。

第三代EGFR抑制剂，现已成为标准一线治疗方案。尽管目前已识别出多种奥希替尼获得性耐药机制，但超过半数患者的特异性耐药驱动因素仍不明确。期待上述耐药机制的探索及潜在靶点的提供，能够为克服EGFR-TKI耐药带来新的思路、新的治疗策略，并助力临床转化研究，为晚期NSCLC患者的治疗带来新的希望。

审批编号：CN-172136

过期日期：2026-02-20

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