高亲和力，活性强劲！JS207（PD-1×VEGF双抗）临床前结果首次揭秘

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此次发表的JS207临床前研究结果进一步夯实了免疫联合抗血管疗法的抗肿瘤协同机制，为JS207在抗肿瘤治疗领域的临床开发奠定了坚实的理论基础。目前，JS207已开展多项I-II期临床研究，涉及非小细胞肺癌（NSCLC）、肝细胞癌（HCC）、肾癌（RCC）、结直肠癌（CRC）等多种肿瘤，期待其能惠及更广泛的肿瘤患者。

JS207是具有IgG4 κ亚型的IgG-VHH四价结构的新型双特性抗体，由全长抗PD-1 IgG抗体和靶向VEGFA的重链可变区（VHH）组成，VEGFA单域抗体通过柔性连接子融合到铰链区。

研究人员采用ELISA检测JS207对PD-1和VEGF分子的结合活性表明，JS207对人PD-1的结合呈剂量依赖性，EC50值为10.4 ng/mL (58.6 pM)，能够有效阻断PD-1/PD-L1、PD-1/PD-L2结合；同时，JS207特异性结合人VEGFA，阻断VEGFA/VEGFR2结合，而对VEGFB, VEGFC, VEGFD, VEGFE和PLGF无作用。

研究人员采用表面等离子共振（SPR）技术评估了JS207对PD-1和VEGFA的结合动力学特征和亲和力，结果显示：JS207对人PD-1的平衡解离常数（KD）值为4.60×10-10 M，亲和力较同类药物高约11倍，与特瑞普利单抗相当；JS207对VEGFA的KD值为9.00×10-12 M，与同类药物更高或相当。

图1：JS207结构示意图（左）和对PD-1、VEGFA的结合亲和力（右）

体外研究显示，JS207展示出了与同类药物更优的免疫活化。JS207显著抑制HUVEC的增殖作用，与同类药物相当或略优。研究人员采用混合淋巴反应（MLR）技术评估了JS207对T细胞活化的作用，结果显示，JS207呈剂量依赖性显著诱导免疫活化相关细胞因子IL−2和IFN−γ释放，与同类药物和特瑞普利单抗联合VEGF−DotAb相当。

图2：JS207展示出了与同类药物更优的免疫活化和抑制HUVEC增殖 (上); JS207诱导IL−2和IFN−γ释放（下）

研究人员采用细胞表面残留PD-1检测和细胞内荧光检测方法评估了PD-1的内化水平，结果显示：JS207能够诱导PD-1内化，且VEGFA存在时，PD-1内化显著增强。采用PD-1报告基因法（RGA）进一步探索了不同VEGFA浓度对PD-1内化的影响，结果显示：VEGFA低浓度(0.017–1.37nM)时，JS207的抗PD-1活性强于同类药物，VEGFA高浓度(111.1 nM或333.3nM)时两者相当。

图3：JS207显著诱导PD-1内化，VEGFA能够进一步增强抗PD-1活性

VEGFA能够增强JS207的PD-1内化作用，可能的机制包括：VEGFA上调靶细胞上PD-1的表达水平；VEGFA结合可以将JS207稳定在PD-1表达的细胞周围，从而增强局部抗体浓度；中和VEGFA可能降低免疫抑制性PD-L1表达，间接增强PD-1阻断；结合形成的“簇”复合物可能促进PD-1交联；此外，PD-1内化增强、协同通路抑制进一步增强JS207的抗PD-1活性。

JS207在小鼠肿瘤模型中显示出显著的抑瘤作用。在小鼠MC38结肠癌模型中，JS207显示出剂量依赖性的抗肿瘤作用，0.75, 1.5和4.5 mg/kg剂量组的肿瘤生长抑制（TGI）率分别为76.1%、78.0%和84.4%，优于特瑞普利单抗单药或联合VEGF−DotAb治疗；在人源化A375黑色素瘤小鼠模型中，JS207 1, 3和10 mg/kg剂量组的TGI率分别为49.6%, 53.7%和72.0%，优于同类药物。同时，试验组小鼠未观察到明显的体重减轻，提示JS207耐受性良好。

图4：结肠癌MC38（上）和黑色素瘤A375（下）小鼠模型中，JS207表现出显著抑瘤作用

注：*p < 0.05, **p < 0.01

热稳定性是抗体生产、储存和有效期的重要影响因素。与传统单克隆抗体相比，双特异性抗体热稳定性通常较低，导致其开发和应用受限。研究人员通过抗PD−1 RGA和抗VEGFA RGA方法评估了JS207的热稳定性，结果显示：JS207热稳定性良好，40℃条件下分别放置24, 48, 96h或1, 4, 6天，JS207的抗PD-1或抗VEGFA效力无明显变化；在55℃高温下，同类药物在24h时几乎完全丧失抗PD-1活性，而JS207仍能保持较强活性（24h时活性约65%）。提示JS207可能作为一种更方便生产、储存和运输的潜在药物。

参考来源：

1. Lin S, Hong M, Zhang J, et al. Front. Immunol. (2025) 16:1612547.

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